

产品概述
product description
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为氨基酸,其最适温度约为37℃。
贝博® 胰蛋白酶溶液(1%)主要由1%胰酶等组成,经过滤除菌,该试剂可以直接用于培养细胞的消化或者一些组织的消化,通常室温下1min左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
贝博® BBcellProbe® 可以提供各种细胞分析试剂盒。包括细胞凋亡、活性、增殖、毒性、活性氧、周期、细胞代谢、氧化应激、膜流动性、膜电位、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、胞外酸化、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种细胞检测试剂盒产品。
贝博® BBcellProbe® 可以为您提供各种细胞成像、细胞示踪与追踪试剂盒产品。包括各种颜色的BBcellProbe® M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品,以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。
注意事项
1. 有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期。
2. 试剂拆封后请尽快使用完!
2. 试剂拆封后请尽快使用完!
适用样本
细胞
仪器准备
1. 细胞培养设备
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
2. 离心机
3. 移液器
4. 冰箱
5. 冰盒
试剂准备
2. PBS 缓冲液(pH7.4,实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液(1X))
(phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
3. 或者Hanks液或无血清培养液
(phosphate buffer saline/Dulbecco’s PBS:约含8mM Na2HPO4、2mM KH2PO4、137mM NaCl和3mM KCl)
3. 或者Hanks液或无血清培养液
耗材准备
1. 离心管2. 吸头
使用注意事项
1. 尽量减少反复冻融的次数,以免失效。
2. 试剂开封后尽快使用,以防影响后续实验效果;
3. 在使用胰蛋白酶溶液的过程中,要特别注意避免胰蛋白酶溶液被细菌污染。
4. 胰蛋白酶溶液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
5. 以下步骤仅供参考,以实际使用习惯为准。
2. 试剂开封后尽快使用,以防影响后续实验效果;
3. 在使用胰蛋白酶溶液的过程中,要特别注意避免胰蛋白酶溶液被细菌污染。
4. 胰蛋白酶溶液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
5. 以下步骤仅供参考,以实际使用习惯为准。
使用方法
根据需要进行贴壁细胞或组织的消化。
1. 贴壁细胞的消化:
(1) 吸除培养液,用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
(2) 加入少量胰蛋白酶溶液,略盖过细胞即可。室温放置0.5~2min,不同的细胞消化时间有所不同。
(3) 显微镜观察,如果细胞明显收缩并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪头吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰蛋白酶溶液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
(4) 如果发现消化不足,则再加入胰蛋白酶溶液重新消化。
(5) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰蛋白酶溶液把细胞全部吹打下来。1000~2000g离心1min,沉淀细胞,尽量去除胰蛋白酶溶液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间差异很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
1. 贴壁细胞的消化:
(1) 吸除培养液,用无菌PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。
(2) 加入少量胰蛋白酶溶液,略盖过细胞即可。室温放置0.5~2min,不同的细胞消化时间有所不同。
(3) 显微镜观察,如果细胞明显收缩并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪头吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰蛋白酶溶液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。
(4) 如果发现消化不足,则再加入胰蛋白酶溶液重新消化。
(5) 如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰蛋白酶溶液把细胞全部吹打下来。1000~2000g离心1min,沉淀细胞,尽量去除胰蛋白酶溶液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。
2. 组织的消化:
不同的组织需要消化的时间差异很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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